《CT理论与应用研究》
当时任诺贝奖化学奖委员会主席贡纳尔冯海涅邀请马丁查菲发表获奖感言时,台下坐着一名特殊的听众,那就是面包车司机:道格拉斯普瑞舍 (Douglas Prasher)。 作为面包车司机,普瑞舍是幸运的,因为他有幸出席汇集了全世界最优秀大脑的诺贝尔颁奖典礼,三位获奖人也无一例外都表达了对普瑞舍的感谢。 但作为一个前生物学家 ,绿色荧光蛋白的获奖,足以让普瑞舍成为最倒霉的一名学者 。 向光而行 2007 年,美国阿拉巴马州亨茨维尔的丰田专卖店里迎来了一位新的员工。他的工作,是每天接送不同的人穿梭在这个小镇,帮助他的雇主更好的卖车。
普瑞舍的乘客做梦也想不到,这个时薪 85 美金司机的研究成果,会在一年后获得科学界最耀眼的奖项。 1979 年,年仅 28 岁的普瑞舍获得了俄亥俄州立大学的生物化学博士学位。初出茅庐的普瑞舍满怀壮志,决心在学术界闯出一片天。 机缘巧合之下,普瑞舍来到了乔治亚大学,作为博士后开始了水母素的研究。
水母素是一种生物发光蛋白,水母通过这种蛋白能呈现出梦幻般的蓝色。 它的发现可以追溯到 1962 年。 那一年,下村脩首次从水母的发光环中分离出两种能够发光的蛋白质,其中一种就是水母素。 当时的生物学研究方法非常有限,生物学家们甚至无法知道基因的具体序列。也正是因为这个原因,在下村脩发现水母素的十多年后,关于水母素的研究并没有什么突破性的进展,这个领域也沦为一个非常小众的领域。 普瑞舍的出现,让水母素的研究出现了转机。 二十世纪九十年代初的生物学界,生物学家们已经可以通过多种方法知道 DNA 的序列,而普瑞舍到达乔治亚大学后的第一个任务,就是对不同的水母素进行测序,这让他与生物界的光结下了不解之缘。当时的测序也不像我们现在一天就能出结果。普瑞舍甚至需要到海边亲自一只只的抓水母,然后立刻将水母冻存并带回实验室提取 DNA。
经过多年的努力,他成功了获得了 5 种水母素的序列。在这篇论文发表的 1987,普瑞舍灵光一闪,有了一个大胆的想法。
克隆 GFP
20 多年前,下村脩不仅发现了水母素,还发现了与水母素协同作用的绿色荧光蛋白(GFP)。水母素在钙离子的激活下会发出蓝光,而这个蓝光能够激活 GFP,使后者发出绿色的荧光。
研究水母素多年的普瑞舍认为,绿色荧光蛋白被蓝光激活的特性,使得它会使一个绝妙的追踪分子。
如果能把绿色荧光蛋白和其他蛋白结合起来,生物学家就能有效的追踪他们感兴趣的蛋白在生物体内的位置。
普瑞舍离开乔治亚大学后来到了位于美国麻省的伍兹霍尔海洋研究所建立了自己的实验室,开始为他的终身职位奋斗。而使用 GFP 标记蛋白这个天马星空的想法,也成为了他最重要的课题。
但不幸的事,普瑞舍的本子没有获得美国最大资助机构国立卫生研究院(NIH)的青睐
,评审人员认为他的理论太过超前,是不可能实现的,而且就算实现,也没有太大的价值。
最后,普瑞舍只能退而求其次,申请了美国癌症协会的资助额仅为 20 万美元的基金。这个为期 2 年的小基金,只足够支持 GFP 的克隆工作。
尽管经费有限,普瑞舍还是出色的完成 GFP 的克隆工作,相关工作 1992 年得以发表。但论文发表后,普瑞舍还是没有申请任何基金来进行后续 GFP 应用的研究。
也许是得知自己申请终身职位无望,也许是单纯的乐于助人。当马丁查菲与钱永健,以及其他实验室发来邮件向他讨要 GFP 克隆时,普瑞舍丝毫没有犹豫地寄出了一份又一份的质粒。
然后,他离开了伍兹霍尔海洋研究所。
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